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proaxsis ProteaseTag主動彈性蛋白酶免疫操作指南

更新時間：2021-03-22 點擊次數：2404

proaxsis ProteaseTag ® 主動彈性蛋白酶免疫操作指南

ProteaseTag® Active Neutrophil Elastase Immunoassay

免疫測定分為兩個部分：
1）一個較大的盒子[58 cm x 38 cm x 35 cm; 體重±10公斤（體重主要是由于凝膠袋）]，其包含需要保持在4℃冷卻并且必須投入在接收到冰箱的液體瓶，
和
2）一個小的內“冷凍箱” [39厘米× 27厘米x 28厘米; 重量±7公斤（重量主要歸因于干冰）]，我們在干冰上單獨發送。

因此，每個套件將[快遞]分2個單獨的包裹寄送，總重為±17公斤。

試劑盒內容物

冷凍箱組件
NE標記	1小瓶含4µl（濃度10 mM）捕獲探針 N,N-二甲基甲酰胺(DMF)
人中性粒細胞彈性蛋白酶標準品	2瓶含6µl天然NE（濃度100µg/ml）的酸性緩沖液
NE結合物	1瓶含25µl 穩定性溶液中與辣根過氧化物酶(HRP)結合的抗人中性粒細胞彈性蛋白酶抗體

主要試劑盒組分
免疫分析板	96孔鏈霉親和素包被微量滴定板（預封閉）
NE清洗緩沖液A濃縮液	24 mL 25倍濃度的緩沖表面活性劑（含防腐劑）
NE洗滌緩沖液B濃縮液	8 mL含防腐劑的25倍濃度緩沖液
NE標準品稀釋劑	15 mL含防腐劑的緩沖液（即用型）
NE試劑稀釋劑	2 x 13 mL含防腐劑的緩沖表面活性劑（即用型）
TMB底物	12 mL四甲基聯苯胺（即用型）
終止液	6 mL 2N硫酸（即用型）
封板機	4個粘合條

需要但未提供的材料

去離子水或蒸餾水
經校準的移液器和相應的移液器吸頭
試管和試管架
清潔稀釋清洗緩沖液的容器
渦旋
培養箱(37 ℃)
能夠在450 nm處讀數的經校準的微量滴定板讀數器

試劑制備

除標準品和樣品外，所有試劑均應在使用前恢復至室溫。使用前，標準品和樣品必須始終置于冰上。

提供了足夠的試劑，可獲得兩條標準曲線。

_清洗緩沖液A-用576 mL去離子水稀釋24 mL濃縮液，制成600 mL清洗緩沖液A

_清洗緩沖液B–量取8 mL濃縮液，加入192 mL去離子水中，制成200 mL清洗緩沖液B

_NE結合物–用11980µl NE試劑稀釋劑稀釋20µl NE結合物，制備12 mL結合物溶液（600倍稀釋）

_NE-Tag–用11997.6µl NE試劑稀釋劑稀釋2.4µl NE-Tag，制備12 mL NE-Tag溶液（5000倍稀釋）

_標準品-

移取495µl NE標準品稀釋液至一個微量管中
移取250µl NE標準品稀釋液至6個后續微量管中
向試管中加入5µl NE標準品。從一個試管移取250µl至下一個試管，進行連續稀釋。轉移至下一試管前，充分混勻各試管。這將創建具有以下NE濃度的校準曲線：1000、500、250、125、62.5、31.25和15.625 ng/mL
使用NE標準品稀釋劑作為零（空白）標準品

_樣品-使用NE標準品稀釋劑適當稀釋。

試驗程序

所有樣品和標準品均應重復測定兩次。